Browsing by Author "Rocha, Roberta Dias Rodrigues"

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    Citometria de fluxo no diagnóstico da leishmaniose visceral canina.
    (2006) Carvalho Neto, A. V.; Rocha, Roberta Dias Rodrigues; Gontijo, Célia Maria Ferreira; Reis, Alexandre Barbosa; Martins Filho, Olindo Assis
    Descreve-se a padronização de nova metodologia para detecção de anticorpos antiformas promastigotas fixadas de L. (L.) chagasi, por citometria de fluxo (AAPF-IgG), sua aplicabilidade e desempenho na identificação de casos de leishmaniose visceral canina (LVC). Foram avaliados dois grupos de cães classificados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), como: não reatores (NR, n=10) e reatores (R, n=50) dos quais foram coletadas amostras de sangue (soro) para realização dos testes laboratoriais. Os resultados relacionados ao estabelecimento, aplicabilidade e desempenho da metodologia AAPF-IgG demonstraram que essa metodologia possibilita a identificação de uma região de reatividade diferencial entre cães NR e R, no soro diluído a 1:2048 e o valor de 20% de parasitos fluorescentes positivos (PPFP) como ponto de corte entre resultados positivos e negativos, mostrando que a AAPF-IgG aplica-se na identificação de casos de LVC, possibilitando distinguir 96% de cães R como positivos e 100% de cães NR como negativos. Esses resultados em conjunto sugerem que a utilização da AAPF-IgG pode ser um novo instrumento para ensaios clínicos de diagnóstico sorológico da LVC.
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    Clinical value of anti-Leishmania (Leishmania) chagasi IgG titers detected by flow cytometry to distinguish infected from vaccinated dogs.
    (2007) Andrade, Renata Aline de; Reis, Alexandre Barbosa; Gontijo, Célia Maria Ferreira; Braga, Lidiane Bento; Rocha, Roberta Dias Rodrigues; Araújo, Márcio Sobreira Silva; Vianna, Leonardo Rocha; Martins Filho, Olindo Assis
    Leishmune® vaccination covers a broader number of endemic areas of canine visceral leishmaniasis (CVL) and therefore the development of new serological devices able to discriminate CVL from Leishmune® vaccinees becomes an urgent need considering the post-vaccine seroconversion detected throughout conventional methodologies. Herein, we have described the establishment of a flow cytometry based methodology to detect anti-fixedL. ( L. ) chagasipromastigotes antibodies (FC-AFPA-IgG, FC-AFPA-IgG1 and FC-AFPA-IgG2) in sera samples from Leishmania ( Leishmania ) chagasiinfected dogs and Leishmune® vaccinees. The results of FC-AFPA were reported along the sera titration curve (1:128–1:524,288), as percentage-of-positive-fluorescent-parasite (PPFP). The use of PPFP = 20% as a cut-off edge to segregate negative and positive results at sera dilution 1:2048 revealed outstanding performance indexes that elect FC-AFPA-IgG and IgG2 (both detected by polyclonal FITC-labeled second step reagent) applicable to the serological diagnosis of CVL, with 100% of specificity for both IgG and IgG2 and 97 and 93% of sensitivity, respectively. Moreover, FC-AFPA-IgG, applied at sera dilution 1:2048, also appeared as a useful tool to discriminate L. chagasiinfected dogs from Leishmune® vaccinees, with 76% of specificity. Outstanding likelihood indexes further support the performance of FC-AFPA-IgG for exclusion diagnosis of CVL in Leishmune® vaccinees. Analysis of FC-AFPA-IgG at sera dilution 1:8192 revealed the most outstanding indexes, demonstrating that besides the ability of PPFP 20% to exclude the diagnosis of CVL, a PPFP values higher 80%, mostly observed for infected dogs (INF) have a minimal change to come from a non-infected animal (NI) or Leishmune®.