Proteômica quantitativa baseada em espectrometria de massas para estudo do trato alimentar de Schistosoma mansoni com ênfase na glândula esofagiana e suas secreções.
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Date
2018
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Abstract
A esquistossomose é uma doença tropical negligenciada que afeta mais de 240 milhões
de pessoas em 78 países. Apesar dos esforços para erradicação da doença, fatores como
baixa cobertura dos programas de tratamento quimioterápico, métodos diagnóstico pouco
sensíveis e reinfecções em regiões endêmicas, constituem desafios para o controle da
transmissão. O desenvolvimento de vacinas contra schistosomas constitui uma ferramenta
alternativa de combate à doença, porém, a identificação de antígenos protetores tem sido
um grande desafio. Neste sentido, destaca-se o modelo de auto cura da infecção em
macaco Rhesus (Macaca mulatta), no qual observa-se eliminação de parasitos após uma
resposta humoral direcionada às interfaces do parasito, como tegumento e secreções da
glândula esofagiana. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo geral a
caracterização proteômica em larga escala de produtos da glândula esofagiana e demais
secreções do trato alimentar de S. mansoni para proposição de novos alvos vacinais. Uma
abordagem quantitativa avaliou a presença de proteínas de interface em homogenato
solúvel de vermes adultos, revelando uma baixa representatividade de moléculas de
interesse nessa fração. A partir disso, um método de enriquecimento tecidual foi utilizado
para a análise detalhada do esôfago de vermes machos adultos. As análises shotgun
quantitativas apontaram 628 grupos de proteínas enriquecidos na região esofagiana,
incluindo Microexon genes (MEG), hidrolases, glicosil transferases e proteínas para
transporte vesicular. Ademais, essa abordagem permitiu a detecção de proteoformas de
MEGs geradas por substituição e/ou deleção de resíduos de aminoácidos. Nove proteínas
expressas na glândula esofagiana foram selecionadas para quantificação absoluta por
QconCAT. A MEG-12 apresentou a maior concentração entre os alvos quantificados. A
estimativa do número de cópias por célula das proteínas secretadas sugere que tais
moléculas constituem alvos abundantes neste subproteoma. Por último, a caracterização
proteômica do sobrenadante de cultura de S. mansoni resultou na detecção de um
repertório expandido de proteínas do trato alimentar, incluindo MEGs esofagianas,
reforçando a eventual exposição das secreções nessa interface parasito-hospedeiro. Em
conjunto, as abordagens proteômicas de caracterização da região esofagiana e trato
alimentar de S. mansoni resultaram na identificação de moléculas com potencial aplicação
biotecnológica no desenvolvimento de vacinas, bem como alvos terapêuticos.
Description
Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
Keywords
Proteômica, Espectrometria de massa, Schistosoma mansoni
Citation
NEVES, Leandro Xavier. Proteômica quantitativa baseada em espectrometria de massas para estudo do trato alimentar de Schistosoma mansoni com ênfase na glândula esofagiana e suas secreções. 2018. 176 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia) - Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2018.