Browsing by Author "Silva, Rodrigo Moreira da"

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    Avaliação da associação de benzonidazol e itraconazol no tratamento de camundongos infectados com clones de Trypanossoma cruzi de grupos genéticos distintos : eficácia terapêutica e farmacocinética.
    (2011) Silva, Rodrigo Moreira da; Lana, Marta de
    O perfil de resistência de clones de Trypanosoma cruzi pertencentes a grupos genéticos distintos em relação ao benzonidazol (BNZ) e itraconazol (ITC) foi anteriormente demonstrado em camundongos. Considerando que a associação de fármacos tem sido mais eficiente no tratamento de diversas infecções, o objetivo deste estudo foi avaliar a associação BNZ + ITC na quimioterapia experimental da doença de Chagas, considerando a variabilidade genética do parasito e sua correlação com a resistência ao tratamento etiológico. Foram utilizados camundongos Swiss infectados via IP com 10x103 tripomastigotas sanguíneos de três estoques clonais pertencentes aos grupos genéticos TcI (P209 Cl1), TcV (BUG2149 Cl10) e TcII (IVV Cl4). Dez dias pós-inoculação e confirmação da infecção, os animais foram tratados via oral com 100 mg/Kg de cada composto durante 20 e 60 dias para o BNZ e ITC respectivamente, inclusive na associação dos fármacos. A avaliação da eficácia terapêutica foi feita por até 110 dias póstratamento por exame de sangue a fresco (ESF), hemocultura (HC), PCR e ELISA. Foram considerados curados os animais que apresentaram todos os exames negativos. O tratamento com BNZ + ITC reduziu significativamente a parasitemia além de outros parâmetros a ela relacionados nos três grupos experimentais. Os índices de cura entre os grupos tratados com BNZ, ITC e BNZ + ITC foram comparados. O tratamento com BNZ + ITC resultou em eficácia terapêutica significativamente maior em relação ao BNZ e ITC isoladamente nos animais infectados pelos três clones estudados. Os índices de cura seguiram a mesma tendência dos tratamentos isolados e apresentaram correlação com a distância filogenética entre os clones de T. cruzi estudados. Um método bioanalítico empregando CLAE com detecção UV precedido de extração líquido-líquido do BNZ e ITC contidos em amostras plasmáticas de animais tratados foi desenvolvido pela primeira vez. O método foi validado de acordo com as especificações do FDA e ANVISA, mostrando-se adequado para ser aplicado ao monitoramento farmacocinético no modelo murino. Os perfis plasmáticos dos fármacos administrados simultaneamente em regime de dose única revelaram significativa diminuição da concentração plasmática máxima (Cmax) do BNZ e significativo aumento do seu tempo de meia-vida de eliminação (t½β) em comparação à monoterapia. Estes resultados sugerem que o aumento da eficácia do BNZ + ITC não se limita apenas aos distintos mecanismos de ação dos fármacos, mas também à interação farmacocinética entre eles, na qual o ITC potencializa o efeito do BNZ por prolongar sua meiavida e consequentemente aumentar sua biodisponibilidade para melhor ação terapêutica.
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    Impact of dual infections on chemotherapeutic efficacy in balb/c mice infected with major genotypes of trypanosoma cruzi.
    (2007) Martins, Helen Rodrigues; Silva, Rodrigo Moreira da; Valadares, Helder Magno Silva; Toledo, Max Jean de Ornelas; Veloso, Vanja Maria; Avelar, Danielle Marchetti Vitelli; Carneiro, Claudia Martins; Coelho, George Luiz Lins Machado; Bahia, Maria Terezinha; Martins Filho, Olindo Assis; Macedo, Andréa Mara; Lana, Marta de
    The aim of this work was to investigate the impact of dual infections with stocks of Trypanosoma cruzi major genotypes on benznidazole (BZ) treatment efficacy. For this purpose, T. cruzi stocks representative of the genetic T. cruzi lineages, displaying different susceptibilities to BZ, belonging to the major T. cruzi genotypes broadly dispersed in North and South America and important in Chagas’ disease epidemiology were used. Therapeutic efficacy was observed in 27.8% of the animals treated. Following BZ susceptibility classification, significant differences were observed in dual infections on the major genotype level, demonstrating that combinations of genotypes 19 39 and genotypes 19 32 led to a shift in the expected BZ susceptibility profile toward the resistance pattern. Analysis on the T. cruzi stock level demonstrated that 9 out of 24 dual infections shifted the expected BZ susceptibility profile compared with the respective single infections, including shifts toward lower and higher BZ susceptibilities. Microsatellite identification was able to identify a mixture of T. cruzi stocks in 7.7% of the T. cruzi isolates from infected and untreated mice (6.9%) and infected and treated but not cured mice (9.0%), revealing in some mixtures of BZ-susceptible and -resistant stocks that the T. cruzi stock identified after BZ treatment was previously susceptible in single infections. Considering the clonal structure and evolution of T. cruzi, an unexpected result was the identification of parasite subpopulations with distinct microsatellite alleles in relation to the original stocks observed in 12.2% of the isolates. Taken together, the data suggest that mixed infections, already verified in nature, may have an important impact on the efficacy of chemotherapy.
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    Pharmacokinetic and tissue distribution of benznidazole after oral administration in mice.
    (2017) Melo, Luísa Helena Perin de; Silva, Rodrigo Moreira da; Fonseca, Kátia da Silva; Cardoso, Jamille Mirelle de Oliveira; Mathias, Fernando Augusto Siqueira; Reis, Levi Eduardo Soares; Molina, Israel; Oliveira, Rodrigo Corrêa de; Vieira, Paula Melo de Abreu; Carneiro, Cláudia Martins
    Specific chemotherapy using benznidazole (BNZ) for Chagas disease during the chronic stage is controversial due to its limited efficacy and toxic effects. Although BNZ has been used to treat Chagas disease since the 1970s, few studies about the biodistribution of this drug exist. In this study, BNZ tissue biodistribution in a murine model and its pharmacokinetic profile in plasma were monitored. A bioanalytical high-performance liquid chromatography method with a UV detector (HPLC-UV) was developed and validated according to the European Medicines Agency for quantification of BNZ in organs and plasma samples prepared by liquidliquid extraction using ethyl acetate. The developed method was linear in the BNZ concentration, which ranged from 0.1 to 100.0 g/ml for plasma, spleen, brain, colon, heart, lung, and kidney and from 0.2 to 100.0 g/ml for liver. Validation assays demonstrated good stability for BNZ under all conditions evaluated. Pharmacokinetic parameters confirmed rapid, but low, absorption of BNZ after oral administration. Biodistribution assays demonstrated different maximum concentrations in organs and similar times to maximum concentration and mean residence times, with means of 40 min and 2.5 h, respectively. Therefore, the biodistribution of BNZ is extensive, reaching organs such as the heart and colon, which are the most relevant organs affected by Trypanosoma cruzi infection, and also the spleen, brain, liver, lungs, and kidneys. Simultaneous analyses of tissues and plasma indicated high BNZ metabolism in the liver. Our results suggest that low bioavailability, instead of inadequate biodistribution, coul