Browsing by Author "Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes"
Now showing 1 - 12 of 12
Results Per Page
Sort Options
Item Avaliação da influência da infecção pelas formas tripomastigotas metacíclicas ou sanguíneas do Trypanosoma cruzi nas alterações imunopatogênicas no colón de camundongos infectados pela cepa VL-10.(2018) Marques, Flávia de Souza; Vieira, Paula Melo de Abreu; Vieira, Paula Melo de Abreu; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Lima, Wanderson Geraldo deO Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, possui em seu ciclo evolutivo duas formas infectivas para os mamíferos – tripomastigota sanguínea (TS) e tripomastigota metacíclica (TM), que diferem quanto as moléculas presentes em sua superfície, impactando na interação inicial parasito/hospedeiro e influenciando o curso da infecção. Com o controle da transmissão vetorial, que ocorre por formas metacíclicas, em alguns países endêmicos, outras formas de infecção ganham importância. Nos últimos anos tem sido registrado casos de transmissão da doença de Chagas em países não-endêmicos, onde a transmissão ocorre por transfusão de sangue e/ou doação de órgãos, provenientes de formas sanguíneas. Dessa maneira, avaliar a influência da infecção pelas formas tripomastigotas metacíclicas ou sanguíneas do Trypanosoma cruzi, nas alterações imunopatológicas no sangue e no colón de camundongos infectados pela cepa VL-10, permitirá uma melhor compreensão dos mecanismos relacionados à patogênese da doença de Chagas. Baseado nisso, o objetivo deste trabalho foi avaliar as alterações relacionadas aos parâmetros imunopatogênicos no cólon durante as fases aguda e crônica da infecção experimental de camundongos Swiss infectados por formas tripomastigotas metacíclicas (TM) ou sanguíneas (TS) da cepa VL-10 do T. cruzi. Os animais infectados com formas TS apresentaram 100% de sobrevida, enquanto essa porcentagem no grupo TM foi de apenas 52%. Além disso, animais infectados com formas TS apresentaram maior área sobre a curva de parasitemia em relação ao grupo TM. A análise das células mononucleares do sangue periférico demonstrou um aumento no percentual de monócitos na fase aguda nos animais infectados com formas TM. Já análise de linfócitos TCD8+ e linfócitos TCD4+ mostrou que independente da fonte do inóculo, houve um aumento e uma redução no percentual dessas células, respectivamente, sendo estas mais precoce no grupo TM. A quantificação da carga parasitária tecidual mostrou que no cólon dos animais infectados com formas TM o número de parasitos foi maior nos dias 7 e 14 após a infecção em relação ao grupo TS. Já no 28, 42 e 180 houve uma inversão desse perfil, apresentando os animais do grupo TS maior carga parasitária nesse órgão quando comparado aos animais do grupo TM. A avaliação do processo inflamatório mostrou que há um aumento dos núcleos celulares nos animais infectados com formas TS e TM nos dias 28, 42 e 50 em relação ao grupo controle , entretanto, na fase crônica da doença os animais infectados com formas TS já apresentavam redução do infiltrado inflamatório enquanto que nos animais infectados com formas TM foi observado presença de processo inflamatório em 240 DAI, sendo também observado aumento da produção de citocinas pró-inflamatórias nos animais infectados com formas TM nessa fase da doença em relação ao grupo controle. A avaliação da denervação do plexo mioentérico demonstrou uma redução em ambos os grupos infectados em relação controle, sendo que mais precoce no grupo TM. Esses resultados sugerem que a infecção por formas TM promove um elevado parasitismo na fase aguda, provocando uma exacerbada ativação do sistema imune, que pode estar relacionado com uma precoce denervação do plexo mioentérico no cólon e também pode ser o responsável pela manutenção do processo inflamatório na fase crônica da doença.Item Biomarcadores inflamatórios em indivíduos adultos com sobrepeso e obesidade.(2014) Lopes, Laís Roquete; Silva, André Talvani Pedrosa da; Ribeiro, Silvana Mara Luz Turbino; Silva, André Talvani Pedrosa da; Costa, Daniela Caldeira; Estanislau, Juliana de Assis Silva GomesA obesidade é um grave problema de saúde publica cuja prevalência vem crescendo acentuadamente nas ultimas décadas, inclusive em países em desenvolvimento. Trata-se de um fenômeno de transição nutricional precursor de doenças crônico-degenerativas não transmissíveis. A obesidade como condição inflamatória basal tem aberto novos horizontes para a identificação demarcadores inflamatórios com utilização em diagnostico ou prognóstico para as doenças crônico-degenerativas. Nesse sentido, o presente estudo objetiva a quantificação de marcadores inflamatórios plasmáticos (CCL2, CCL5, CXCL16, leptina, resistina e BMP-2) correlacionando-os com marcadores clínicos, bioquímicos (glicose de jejum, hemograma completo, colesterol total e frações, hormônios T3, T4 e TSH) e antropométricos (peso, altura, circunferências corporais, pregas cutâneas e porcentagem de gordura corporal) em adultos jovens (18 a 30 anos) com sobrepeso e obesidade. Nossos resultados demostraram aumento dos parâmetros antropométricos em indivíduos com sobrepeso/obesidade, bem como dos níveis plasmáticos dos marcadores, exceto o BMP-2. Ainda, observou-se correlação da resistina, CCL2 e CCL5 com valores de índice de massa corporal e porcentagem de gordura corporal nos indivíduos avaliados. Dessa forma, o presente estudo indica um risco potencial para os indivíduos com sobrepeso pela similaridade nos níveis de marcadores inflamatórios associados às comorbidades associadas à obesidade. Sugere-se, ainda, que novas investigações sejam realizadas objetivando um estudo de amostragem populacional para confirmação das quimiocinas CCL5, CCL2, CXCL16 como indicadores de prognóstico clinico para comorbidades associadas à obesidade humana.Item Caracterização dos aspectos inflamatório e funcionais do ventrículo esquerdo em cães infectados com a cepa Berenice 78 do Trypanosoma cruzi após terapia com doxiciclina e benznidazol.(2018) Lopes, Laís Roquete; Silva, André Talvani Pedrosa da; Figueiredo, Vivian Paulino; Silva, André Talvani Pedrosa da; Silva, Glenda Nicioli da; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Silva, Marcelo Eustáquio; Giunchetti, Rodolfo CordeiroA cardiopatia chagásica (CC) induzida pelo Trypanosoma cruzi é uma manifestação clínica dependente da resposta inflamatória gerada pelo hospedeiro, ocasionando destruição celular/tecidual e, consequente, remodelamento na matriz extracelular cardíaca. Citocinas, quimiocinas e outras proteínas solúveis ou de membrana participam desta resposta imune e, por isso, estratégias farmacológicas para regular estes mediadores e desacelerar o remodelamento cardíaco na CC tornam-se importantes focos de investigação. Na presente proposta, 30 cães sem raça definida foram infectados (ou não) pela cepa Berenice-78 (Be-78) do T. cruzi e submetidos ao tratamento diário com doses sub-antimicrobial do antibiótico doxiciclina/Dox durante 12 meses de infecção (sendo 50mg/Kg manhã e 50mg/kg noite), em associação (ou não) com o tratamento por 60 dias com o Benznidazol/Bz (7mg/kg – administrado à partir do 8º mês de infecção), fármaco com ação anti-T. cruzi. Antes e durante os 12 meses de infecção, estes animais foram avaliados trimestralmente quanto à função cardíaca (ecocardiografia/ECO) e, após a eutanásia, o tecido cardíaco (átrios e ventrículos) dos animais foram conservados para avaliação: (i) dos aspectos histopatológicos (ii) da cinética da CCL2 plasmática e ventricular esquerda e da expressão dos receptores de quimiocinas (CCR3 a 6, CCR8 e CXCR3), ambos no ventrículo esquerdo (VE). Estes parâmetros foram avaliados, em paralelo à análise ecocardiográfica. Observamos que os tratamentos reduziram a massa cardíaca nos animais. A avaliação histológica mostrou aumento do infiltrado inflamatório no VE dos animais infectados, mas Dox conseguiu reduzi-lo. A produção de CCL2, TNF e IFN-gama no VE foi semelhante em todos os animais infectados, mas no plasma aumentaram no 14º mês de tratamento em relação ao grupo não infectado. Juntos, esses dados apontam para o potencial papel das doses sub-antimicrobianas de Dox, em associação com o Bz, como estratégia farmacológica de melhora morfofuncional cardíaca associada à infecção pelo T. cruzi. Entretanto, novos estudos com diferentes populações genéticas do parasita e com o estudo da farmacocinética de Dox merecem atenção para consolidar essa proposta.Item CXCL-16, IL-17, and bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) are associated with overweight and obesity conditions in middle-aged and elderly women.(2017) Ribeiro, Silvana Mara Luz Turbino; Lopes, Laís Roquete; Costa, Guilherme de Paula; Figueiredo, Vivian Paulino; Bajracharya, Deena Shrestha; Batista, Aline Priscila; Nicolato, Roney Luiz de Carvalho; Oliveira, Fernando Luiz Pereira de; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Silva, André Talvani Pedrosa daThe current concept of overweight/obesity is most likely related to a combination of increased caloric intake and decreased energy expenditure. Widespread inflammation, associated with both conditions, appears to contribute to the development of some obesity-related comorbidities. Interventions that directly or indirectly target individuals at high risk of developing obesity have been largely proposed because of the increasing number of overweight/obese cases worldwide. The aim of the present study was to assess CXCL16, IL-17, and BMP-2 plasma factors in middle-aged and elderly women and relate them to an overweight or obese status. In total, 117 women were selected and grouped as eutrophic, overweight, and obese, according to anthropometric parameters. Analyses of anthropometric and circulating biochemical parameters were followed by plasma immunoassays for CXCL-16, IL- 17, and BMP-2.Item Desenvolvimento de livro sobre enfrentamento da obesidade para atualização docente.(2019) Ferreira, Cyntia Silva; Machado, Evandro Marques de Menezes; Moreira, Leandro Marcio; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Zama, Uyrá dos Santos; Machado, Evandro Marques de Menezes; Moreira, Leandro MarcioAtualmente, a obesidade representa uma epidemia mundial, sendo alarmante sua alta prevalência em crianças e adolescentes. Em paralelo, a partir do ano de 2019, os currículos dos ensinos fundamental e médio devem incluir, de modo transversal, o tema educação alimentar e nutricional (EAN) nas disciplinas obrigatórias de ciências e biologia (Lei 13.666/2018 que altera a Lei de Diretrizes e Bases da Educação Nacional - LDB - Lei 9.394/1996). Esse cenário é favorável para abordagens educativas que trabalhem o enfrentamento da obesidade nas escolas; no entanto, não existe nenhum material para atualização docente nesse âmbito. Pensando na satisfatória implementação da lei supracitada e na prevenção e combate à obesidade, torna-se relevante o despertar da percepção desse tema nos professores. Para tanto, foi desenvolvido um livro para atualização docente sobre conceitos para enfrentamento da obesidade. Para elaboração do livro, foi realizada uma pesquisa bibliográfica utilizando uma série de descritores, isolados ou agrupados de diferentes formas, tais como: “obesidade infantil”; “prevenção obesidade escolares”; “obesidade mídia”; “obesidade bullying”. Em seguida, foi feita a seleção da amostra (n = 528) por meio de critérios de inclusão (ex.: artigos originais ou de revisão acessíveis on-line, completos e publicados nos idiomas português e inglês) e de exclusão (ex.: trabalhos publicados no formato de teses, dissertações, monografias, cartas e editoriais). Além disso, informações provenientes de livros acadêmicos e artigos científicos foram incorporadas na obra. O livro traz atualizações para que os docentes possam agregar a EAN e a divulgação científica (DC) em suas aulas, explorando um enfoque em ciência, tecnologia e sociedade (CTS), uma vez que aproxima o conteúdo teórico à realidade cotidiana, podendo gerar argumentações e reflexões críticas sobre o enfrentamento da obesidade. Além disso, são abordados conceitos bioquímicos da obesidade, como metabolismo e nutrição; aspectos culturais, como a influência da mídia; e ainda, questões sociais, como a prática de bullying. O livro, fruto dessa pesquisa, poderá auxiliar no despertar do interesse docente pelas inovações científicas e pelas atividades reflexivas e argumentativas no ensino de ciências.Item Efeito do polimorfismo biológico e molecular do Trypanosoma cruzi sobre a resposta imune e as alterações teciduais no coração e cólon de camundongos na fase crônica da infecção.(2020) Duarte, Thays Helena Chaves; Vieira, Paula Melo de Abreu; Paiva, Nívia Carolina Nogueira de; Vieira, Paula Melo de Abreu; Paiva, Nívia Carolina Nogueira de; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Béla, Samantha RibeiroVários fatores atuam na patogênese da doença de Chagas (DCh), alguns são inerentes ao Trypanosoma cruzi, enquanto outros estão relacionados ao hospedeiro. Estudos demonstram uma associação entre o desenvolvimento de distintas formas clínicas e o tropismo tecidual de diferentes linhagens do T. cruzi, apontando o polimorfismo genético como fator crítico para o prognóstico da doença. Dados prévios do nosso grupo de pesquisa demonstraram que um isolado da cepa Berenice-78 (Be-78is) tem características histopatológicas semelhantes à cepa Be-62, bem como parasitemia semelhante à Be-78 parental, na fase aguda da DCh. Diante disso, esse trabalho teve como objetivo avaliar o efeito do polimorfismo biológico e molecular do T. cruzi sobre o processo inflamatório e as alterações da matriz extracelular no coração e cólon de camundongos ao longo da fase crônica da infecção experimental. Para isso 80 camundongos BALB/c foram divididos em quatro grupos experimentais: NI (não infectados), cepa Be-62, isolado Be-78is e cepa Be-78 parental, os animais foram eutanasiados aos 90 dias após a infecção (DAI). Os dados obtidos neste trabalho, mostram que os animais infectados pela cepa Be-78 parental mantiveram a carga parasitária no coração ao longo da infecção, se comparado aos dados da fase aguda (Nogueira-Paiva, 2015) no entanto, aos 90DAI, o processo inflamatório, exuberante na fase aguda foi capaz de gerar dano tecidual reparado com uma discreta fibrose, sugerindo na fase crônica recente, uma situação de equilíbrio entre parasito-hospedeiro, que pode estar relacionada à presença de amastigotas quiescentes, incapazes de gerar estímulo antigênico necessário à inflamação, portanto, “protegidas” do efeito citotóxico da resposta imune celular. Em contrapartida, os animais infectados pelo isolado Be-78is apresentavam um histotropismo preferencial para o cólon e uma resposta imune aparentemente controlada no coração, demonstraram, aos 90DAI, neste órgão, carga parasitária maior que a observada na fase aguda (Nogueira-Paiva, 2015) que embora, inferior em relação à cepa parental, acompanhada de processo inflamatório que foi importante no controle do parasitismo tecidual. Em detrimento do processo inflamatório sustentado na fase crônica, nenhuma alteração na expressão de laminina e conexina 43 foi observado nos animais infectados em relação os animais não infectados, o que pode estar relacionado ao aumento da citocina IL-10 encontrado nos animais infectados pelo isolado Be-78is que foi capaz de imunomodular o efeito citotóxico da resposta inflamatória. Assim, podemos concluir que no coração, o isolado Be-78is parece apresentar um perfil atrasado em relação à cepa Be-78 parental, podendo estar relacionado a uma patogenicidade inferior ou até mesmo por apresentar uma infecção mais silenciosa, sendo necessárias análises mais tardias que poderiam evidencia melhor as lesões causadas nos casos clínicos na DCh.Item Imunogenicidade de três frações antigênicas de Leishmania amazonensis como candidatos vacinais avaliados em hamster contra leishmaniose visceral.(2015) Amorim, Danielle Rodrigues de; Giunchetti, Rodolfo Cordeiro; Giunchetti, Rodolfo Cordeiro; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Mosqueira, Vanessa Carla FurtadoA Leishmaniose é um conjunto de síndromes complexas e multifacetadas causadas por espécies de protozoários do gênero Leishmania, sendo transmitida através da picada de flebotomíneos infectados. Endêmica em 88 países do mundo estima-se que cerca de 350 milhões de pessoas estão em risco de contrair a doença, e aproximadamente 12 a 14 milhões estão infectadas. Cerca de 500 mil pessoas desenvolvem a forma visceral da doença, sendo que 90% dos casos ocorrem na Índia, Bangladesh, Nepal, Sudão, e no Brasil. Diversos pesquisadores no mundo tem buscado respostas para a prevenção da leishmaniose visceral canina (LVC), através da caracterização de antígenos de espécies de Leishmania, já que o cão é considerado o reservatório doméstico do parasito e um importante elo na cadeia epidemiológica de transmissão da doença. Ainda não existe uma vacina que apresente eficácia vacinal compatível para o controle da LVC e que seja recomendada pelo Ministério da Saúde de nosso país como medida profilática da doença. Considerando o hamster amplamente utilizado como modelo experimental em ensaios vacinais com diversos protocolos anti-Leishmania, estabelecemos uma plataforma para testes rápidos in vivo buscando avaliar simultaneamente diferentes candidatos vacinais. Neste sentido, o presente projeto propôs a avaliação de um ensaio pré-clínico vacinal, em hamsters Mesocricetusauratus, considerando aspectos relacionados à inocuidade, toxicidade e imunogenicidade dos candidatos contra leishmaniose visceral, entre os quais: (i) grupo inoculado com salina 0,85% estéril, (ii) grupo inoculado com adjuvante saponina, (iii) grupo inoculado com antígeno bruto de Leishmania amazonensis(LA), (iv)grupo inoculado comantígeno solúvel de L. amazonensis(LASol), (v) grupo inoculado com antígeno particulado de L. amazonensis (LAPart), (vi) grupo inoculado com antígeno bruto de L. amazonensis associado a saponina (LASap), (vii) grupo inoculado com antígeno solúvel de L. amazonensis associado a saponina (LASapSol)e (viii)grupo inoculado comantígeno particulado de L. amazonensis associado a saponina (LASapPart). Os resultados mostraram que nenhuma das formulações vacinais induziu alterações no local do inóculo ou alterações sistêmicas avaliadas pela inspeção clínica e pelo hemograma. Deste modo, ficou constatado que as diferentes formulações vacinais não induziram hemólise ou anemia nos diferentes grupos avaliados. A análise do leucograma revelou linfocitose restrita apenas aos grupos que receberam antígenos vacinais associados ou não ao adjuvante saponina. De forma semelhante, a análise de antigenicidade revelou aumento dos níveis de IgG total anti-Leishmania, acima do cut-off, nos mesmos grupos que apresentaram linfocitose. A análise do immunoblotting, realizada nas formulações em que foi associado antígeno ao adjuvante saponina (LASap, LASapSol, LASapPart), demonstrou a presença de três bandas imunogênicas com peso molecular próximas de 40 kDa, 30 kDa e bandas entre 20 e 30 kDa. As proteínas encontradas nesse trabalho abrem perspectivas para a análise de novas formulações vacinais contra a leishmaniose visceral.Item Influência da alteração dos níveis de ferro sobre o curso crônico da infecção de camundongos pela cepa Y do Trypanosoma cruzi e sobre a dinâmica das populações dos parasitos reisolados por hemocultura.(2010) Bandeira, Lorena Cera; Carneiro, Cláudia Martins; Veloso, Vanja Maria; Carneiro, Cláudia Martins; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Mosqueira, Vanessa Carla FurtadoNo presente trabalho foi investigada, na primeira etapa, a cura parasitológica e o processo inflamatório cardíaco e hepático em camundongos cronicamente infectados pela cepa Y do Trypanosoma cruzi e que foram submetidos à alteração dos estoques de ferro pelo uso da Desferrioxamina (DFA), tratados ou não com Benzonidazol (Bz). Utilizaram-se 80 camundongos Swiss, machos, 30 dias de idade, distribuídos em quatro grupos experimentais: INT - infectado e não tratado; BZ - infectado e tratado com Bz durante 21 dias; DFA-35 - infectado e tratado com DFA durante 35 dias e DFA/BZ-35 - infectado e tratado com Bz e DFA durante 35 dias. Dezoito meses após o inóculo foi observado que 16 camundongos (13,3%) sobreviveram à infecção. É importante mencionar que camundongos infectados com a cepa Y não sobrevivem à fase aguda da infecção. Foram utilizadas técnicas de ELISA, Hemocultura e PCR e, apesar da taxa de sobrevida de 20% nos grupos BZ e DFA-35 e 40% no grupo DFA/BZ-35, nenhum dos camundongos foi considerado curado. Isoladamente, os índices de cura foram 0% pela ELISA, 81,25% pela hemocultura e 25% pela PCR. Foi avaliado também o processo inflamatório do coração e fígado destes animais para verificar a influência dos diferentes protocolos sobre estes órgãos. Os resultados demonstraram que os animais do grupo BZ apresentaram processo inflamatório cardíaco e hepático mais intenso que o observado nos demais grupos. Fragmentos de DNA do T. cruzi foram detectados em 47,5% (67/144) das reações de PCR realizadas em diferentes tecidos dos 16 camundongos avaliados. O cólon (12/16 -75%) e o baço (4/16 - 25%) apresentaram a maior e a menor taxa de positividade respectivamente. Os resultados obtidos sugerem que os diferentes esquemas terapêuticos não promoveram a cura parasitológica nos animais. Entretanto a associação DFA/BZ-35 além de permitir uma maior sobrevida também protegeu o coração do desenvolvimento de lesões, semelhante ao observado nos animais apenas submetidos ao tratamento com DFA. Na segunda etapa, foi realizada a caracterização biológica e bioquímica das populações isoladas por hemocultura. Utilizaram-se 120 camundongos Swiss, alocados nos seguintes grupos experimentais: Cepa Y, Isolado 1A, Isolado 1B, Isolado 2A, Isolado 2B e Isolado 3. A sobrevida foi maior para os animais inoculados com os isolados 1A, 2A, 2B e 3. O período pré-patente (PPP) e o pico máximo de parasitemia (PMP) observados para os isolados foram significativamente menores do que os valores da cepa Y. O isolado 1A apresentou o maior período patente (PP) (18 dias) e o isolado 1B o dia do pico máximo de parasitemia (DPMP) mais tardio. Em relação ao processo inflamatório no coração e fígado, não foram observadas diferenças significativas entre os grupos estudados. A avaliação do perfil eletroforético de isoenzimas revelou que não houve alteração para os sistemas avaliados (GPI, PGM, G6PD, ICD, GDH, MPI e 6PGDH) quando comparados à cepa Y. Esses resultados sugerem que o protocolo utilizando Bz e DFA associados pode ter alterado a dinâmica populacional dessa cepa ou ainda favorecido o surgimento de uma população menos patogênica, entretanto, não alterou seu comportamento bioquímico.Item Lesões cardíacas associadas à infecção oral pelo T. cruzi em camundongos.(2020) Carvalho, Thaís Vieira de; Carneiro, Cláudia Martins; Vieira, Paula Melo de Abreu; Vieira, Paula Melo de Abreu; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Lima, Wanderson Geraldo de; Béla, Samantha Ribeiro; Veloso, Vanja MariaA via oral representa atualmente a principal forma de transmissão do T. cruzi no Brasil, especialmente na região Amazônica. Os surtos da doença de Chagas por essa via ocorrem em sua maioria pela contaminação de alimentos como o açaí e os indivíduos apresentam quadros graves com acometimento cardíaco. Além disso, altas taxas de mortalidade são registradas ainda na fase aguda da doença. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar as lesões cardíacas em camundongos infectados pela via oral e intraperitoneal com as cepas Be-78 e VL-10 do T. cruzi. Para isso, camundongos Swiss foram distribuídos em três grupos experimentais: controle não infectado (C); infectados pela via oral (VO) e infectados pela via intraperitoneal (VI). Os animais dos grupos VO e VI foram inoculados com 1x105 formas tripomastigotas metacíclicas das cepas Be-78 e VL-10 e eutanasiados nos dias 14, 21, 28, 35, 42 (fase aguda) e 180 (fase crônica) após a infecção para a cepa Be-78 e no dias 14, 21 e 28 (fase aguda) após a infecção para a cepa VL-10. Foram avaliadas a curva de parasitemia e a taxa de sobrevida durante todo o experimento. Além disso, foram coletados o sangue periférico para a obtenção do soro com o objetivo de analisar a atividade da isoenzima CKMB e o coração in totum para avaliar o parasitismo cardíaco, o processo inflamatório, a neoformação de colágeno e a expressão de fibronectina (FN). Na infecção com a cepa Be-78, o grupo VO apresentou pico máximo de parasitemia no 24° DAI e o grupo VI no 23º DAI. Em relação à infecção com a cepa VL-10, o grupo VO apresentou pico máximo de parasitemia no 22° DAI e o grupo VI no 21º DAI. Na infecção com a cepa Be-78, os animais do grupo VO apresentaram aumento significativo do parasitismo cardíaco no 21º DAI e no 21º e 28º DAI no grupo VI. Já na infecção com a cepa VL-10, o parasitismo cardíaco apresentou aumento significativo somente no grupo VI no 21º DAI. Em relação à atividade de CK-MB, somente os animais do grupo VO apresentaram aumento, sendo estes no 14º e 35º DAI na infecção com a cepa Be-78, enquanto que na infecção com a cepa VL-10 a dosagem da atividade de CK-MB foi maior no 14º e 21º DAI no grupo VO e no 21º DAI no grupo VI. Quanto ao processo inflamatório, na infecção com a cepa Be-78 observou-se aumento durante toda a fase aguda no grupo VO e no 35º e 42º DAI no grupo VI. Na infecção com a cepa VL10, o processo inflamatório no grupo VO também foi anterior, observado no 14º e 21º DAI e enquanto no grupo VI ocorreu somente no dia 21º DAI. Em relação ao reparo tecidual, foi detectado deposição de colágeno somente na infecção com a cepa VL-10, no 28º no grupo VI. A expressão de FN foi avaliada na fase aguda tardia (42º DAI) e na fase crônica (180º DAI) da infecção com a cepa Be-78, e somente o grupo VO apresentou aumento da expressão de FN no 42º DAI. Esses resultados indicam que a infecção pela via oral com as formas tripomastigotas metacíclicas das cepas Be-78 e VL-10 do T. cruzi resultaram em lesões cardíacas mais precoces e intensas na fase aguda em relação à via intraperitoneal.Item Multicomponent LBSap vaccine displays immunological and parasitological profiles similar to those of Leish-Tec® and Leishmune® vaccines against visceral leishmaniasis.(2016) Mendonça, Ludmila Zanandreis de; Resende, Lucilene Aparecida; Lanna, Mariana Ferreira; Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar; Roatt, Bruno Mendes; Castro, Renata Alves de Oliveira e; Batista, Maurício Azevedo; Lemos, Denise da Silveira; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Fujiwara, Ricardo Toshio; Rezende, Simone Aparecida; Martins Filho, Olindo Assis; Oliveira, Rodrigo Corrêa de; Dutra, Walderez Ornelas; Reis, Alexandre Barbosa; Giunchetti, Rodolfo CordeiroBackground: In past years, many researchers have sought canine visceral leishmaniasis (CVL) prevention through the characterization of Leishmania antigens as vaccine candidates. Despite these efforts, there is still no efficient vaccine for CVL control. Methods: In the present study, we performed a pre-clinical vaccine trial using BALB/c mice to compare the effects of the multicomponent LBSap vaccine with those of Leish-Tec® and Leishmune®. Blood was collected to determine the frequency of peripheral blood cells and to evaluate hematologic and immunophenotypic parameters. Liver and spleen samples were collected for parasitological quantification, and spleen samples were used to access the cytokine profile. Results: When measuring total IgG and IgG1 anti-Leishmania levels after the third vaccination and L. infantum challenge, it was evident that all vaccines were able to induce humoral immune response. Regarding the innate immune response, increased levels of NK CD3-CD49+ cells were the hallmark of all vaccinated groups, whereas only the Leish-Tec® group displayed a high frequency of CD14+ monocytes after L. infantum challenge. Moreover, CD3+CD4+ T cells were the main circulating lymphocytes induced after L. infantum challenge with all evaluated vaccines. Importantly, after L. infantum challenge, splenocytes from the Leishmune® vaccine produced high levels of IL-2, whereas a prominent type 1 immune response was the hallmark of the LBSap vaccine, which presented high levels of IL-2, IL-6, TNF-α, and IFN-γ. The efficacy analysis using real-time polymerase chain reaction demonstrated a reduction in the parasitism in the spleen (Leishmune®: 64 %; LBSap: 42 %; and Leish-Tec®: 36 %) and liver (Leishmune®: 71 %; LBSap: 62 %; and Leish-Tec®: 48 %). Conclusions: The dataset led to the conclusion that the LBSap vaccination was able to induce immune and efficacy profiles comparable with those of commercial vaccines, thus demonstrating its potential as a promising vaccine candidate for visceral leishmaniasis control.Item Perfil de mediadores inflamatórios produzido por células da linhagem J774 após estímulo in vitro com a IL-33 e antígeno/parasito o Trypanosoma cruzi.(2020) Oliveira, Daniela Silva de; Silva, André Talvani Pedrosa da; Perucci, Luiza Oliveira; Silva, André Talvani Pedrosa da; Perucci, Luiza Oliveira; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Isoldi, Mauro CésarNa infecção pelo protozoário Trypanosoma cruzi, citocinas de perfil inflamatório exercem importante papel na imunopatogênese, enquanto outras apresentam suas ações ainda incertas, como é o caso da interleucina (IL)-33. O objetivo deste estudo é avaliar o perfil de resposta inflamatória induzido por células de cultura estimuladas com a IL-33 e com o T. cruzi (parasito vivo e antígenos – Ags). Na etapa I, Ags obtidos de parasitos da cepa Y do T. cruzi em diferentes concentrações (0; 12,5; 25; 50; 100 e 200 µg/mL) foram utilizados para estimular células da linhagem J774, após 24h, sendo o sobrenadante coletado para a dosagem do TNF (fator de necrose tumoral) por imunoensaio enzimático (ELISA). Assim, a dose selecionada foi a de 100µg para estimular as células. Na etapa II, realizou-se o cultivo de células J774 adicionando 5x105 células/poço para o estímulo com antígeno. Na etapa III foram plaqueadas cerca de 1,25x105 células/poço utilizando1x106 formas tripomastigotas metaciclícas do T. cruzi como estímulo. Os estímulos seguiram o seguinte padrão: (i) cultura sem IL-33 e sem antígeno/T. cruzi; (ii) cultura com IL-33 (10 ng/ml) e sem antígeno/T. cruzi; (iii) cultura sem IL-33 com antígeno (100µg/mL) e T. cruzi; (iv) cultura com IL-33 (10ng/ml) e com antígeno (100µg/mL) e T. cruzi. As culturas foram avaliadas em diferentes tempos após os estímulos, sendo eles 0h, 24h e 48h e os sobrenadantes coletados para dosagem dos mediadores inflamatórios: TNF, IL-17 (interleucina 17), CCL2 (ligante 2 da quimiocina do grupo CC), IL-10 (interleucina 10), dosagem de nitrito pelo método de Griess e contagem de amastigotas. Observou-se diferenças na produção do TNF, IL-17, CCL2 para os grupos estimulados pelo antígeno ou pelo T. cruzi nos tempos de 24h e 48h. Para a citocina IL-10, essas diferenças foram observadas apenas nos grupos estimulados com o T. cruzi. Em relação ao nitrito, observou-se diferenças nos grupos estimulados com Ag ou T. cruzi paras os tempos 0h, 24h e 48h. O número de formas amastigotas foi maior nas células estimuladas com a citocina IL-33. De forma geral, tanto o antígeno quanto o T. cruzi vivo, induziu a produção de mediadores inflamatórios nas células J774 com 24h ou de 48h. A IL-33 mostrou-se importante nos eventos iniciais da infecção tanto em células estimuladas com o Ag quanto com o parasito vivo, bem como no controle da citocina IL-10 nos grupos infectados. Dessa forma, concluímos que a citocina IL-33 durante a infecção in vitro pelo T. cruzi, em cultura de células J774, participa na produção de mediadores inflamatórios e regulatórios.Item The overweight increases circulating inflammatory mediators commonly associated with obesity in young individuals.(2018) Lopes, Laís Roquete; Ribeiro, Silvana Mara Luz Turbino; Figueiredo, Vivian Paulino; Leite, Ana Luísa Junqueira; Nicolato, Roney Luiz de Carvalho; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Oliveira, Fernando Luiz Pereira de; Silva, André Talvani Pedrosa daObesity is a serious and growing world healthy problem affecting developed and developing countries. The new conception of obesity as a basal inflammatory condition has opened a new window of possibilities to identify inflammatory biomarkers to be used in the diagnosis or prognosis of obesity-associated comorbidities. This present work aims the identification of the adipokines (leptin and resistin), chemokines (CCL2, CCL5, CXCL16) and the BMP-2 and their association with the clinical, biochemical (fasting glucose, hemogram, cholesterol, T3, T4 and TSH) and anthropometric (weight, height, body circumferences, skinfold thickness and percentage of body fat) parameters in young adults (18–30 years old) presenting obesity and overweight. Our data showed increasing in anthropometric parameters and in the plasma inflammatory levels in those individuals presenting overweight and obesity. We observed a higher plasma levels of CCL2, CCL5, CXCL16, leptin and resistin in those overweigh and obese individuals. In addition, the CCL2, CCL5 presented a positive correlation with the body mass index and the body fat percentage. Assuming the obesity as a systemic inflammatory process, in this current study, the overweight individuals possess a close similar pattern of circulating inflammatory mediators which might be a potential risk of the development of obesity comorbidities. Further studies are still needed to precise the role of the biomarkers CCL2, CCL5, CXCL16 and BMP-2 in the clinical prognosis related to the overweight or obese individuals.