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    Ação do resveratrol e das tinturas das cascas e das folhas de Vitis labrusca L. var. Isabel na hiperlipidemia induzida em coelhos.
    (2010) Fonseca, Karina Zanoti; Oliveira, Tânia Toledo de; Nagem, Tanus Jorge; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Pedrosa, Maria Lúcia; Oliveira, Tânia Toledo de; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado
    As doenças crônicas não transmissíveis acometem milhões de pessoas em todo o mundo e seu principal fator de risco é a hiperlipidemia. A terapia medicamentosa para a hiperlipidemia pode envolver efeitos colaterais que dificultam a adesão ao tratamento. Assim, somando-se ao grande potencial fitoterápico que algumas plantas do território brasileiro possuem e o incentivo da fitoterapia no Sistema Único de Saúde, é necessário investigar novas formas de tratamento. Neste trabalho investigou-se o efeito do resveratrol e das tinturas das cascas e das folhas da uva Vitis labrusca L. var. Isabel em coelhos com hiperlipidemia induzida. Os animais utilizados foram fornecidos pelo setor de Cunicultura do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Viçosa, sendo 72 coelhos da raça Nova Zelândia, machos, albinos, com idade de 55 dias e peso de 2000 g, divididos em 12 grupos, sendo um doente sem tratamento, um controle, atorvastatina (medicamento utilizado como padrão) e outros 9 grupos que receberam três doses crescentes de resveratrol, tintura das cascas e das folhas. Os animais foram tratados diariamente durante 60 dias, juntamente com a dieta acrescida de 1% de colesterol. Os parâmetros sanguíneos: colesterol total; HDL; triglicérides; Gama GT; creatinina; ácido úrico; uréia; TGO; TGP, lipase foram analisados. A análise histológica das artérias e do fígado foi realizada para complementar as análises. Os dados foram analisados pelo teste de ANOVA seguido pelo teste de Tukey. Para a identificação do resveratrol em todas as partes aéreas da uva pesquisada, foi utilizado o cromatógrafo a líquido Waters Corporation, USA, 2695. Para separação dos compostos utilizou-se uma coluna de fase reversa Symnethy C18 (4,6 x 75 mm, 3,5 μm) com detector de arranjo diodo UV/VIS. No tempo 30, o resveratrol e a tintura das cascas nas maiores doses produziram a maior redução de colesterol total. Para HDL o grupo resveratrol 37,5 mg foi o melhor e para a atividade da lipase foi o grupo que recebeu a tintura das folhas 1,5 mL. Resveratrol na 22,5 mg e tintura das cascas na 2,0 mL foram os tratamentos que mais reduziram os níveis de triglicérides. No tempo 60, o tratamento com tintura das cascas 2,0 mL produziu o melhor resultado para colesterol total, HDL, o grupo resveratrol 37,5 mg, triglicérides e atividade da lipase, o grupo que recebeu tintura das folhas 2,0 mL. A análise histológica revelou que os grupos tintura da casca, tintura da folha e resveratrol nas maiores doses tiveram os melhores efeitos na aterosclerose produzida pela hiperlipidemia, sendo comparados à estatina, enquanto os outros grupos não diferiram do grupo doente sem tratamento.a análise do fígado mostrou que o grupo resveratrol 56,5 mg não diferiu do grupo controle, enquanto a atorvastatina foi o tratamento que produziu maior toxicidade e esteatose. Todos os outros grupos foram melhores que o medicamento de mercado. O trans resveratrol não foi identificado em nenhuma das partes aéreas, enquanto o cis foi detectado em todas.
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    Análise da atividade antiviral de compostos derivados de naftoquinonas naturais e sintéticas sobre a replicação de Dengue virus em modelo in vitro.
    (2016) Silveira, Paola Faria da; Silva, Breno de Mello; Brandão, Geraldo Célio; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Magalhães, José Carlos de
    O Dengue virus (DENV) possui quatro sorotipos diferentes (1-4) que são principalmente transmitidos pelo mosquito Aedes aegypti. A infecção resulta na patogênese da dengue, que é uma epidemia de proporções globais. Apesar dos esforços, ainda não existe uma vacina eficaz contra os quatro sorotipos, bem como drogas eficientes no tratamento de pacientes. Portanto, vários estudos tem sido conduzidos na busca de fármacos com atividade antiviral contra o DENV e outros Flavivirus. Dentre os compostos estudados para este fim, estão as naftoquinonas, metabólitos secundários produzidos por algas, fungos, plantas e animais. Estes compostos podem ser extraídos principalmente a partir de plantas do gênero Tabebuia (família Bignoniaceae), são caracterizados por apresentar atividade antiviral, destacando-se a ß-lapachona, potente inibidor da enzima transcriptase reversa dos vírus mieloblastose aviária (AMV) e leucemia murina de Rauscher (RLV). O objetivo deste trabalho foi testar oito diferentes compostos derivados de naftoquinonas sintéticas e naturais com potencial atividade antiviral contra DENV. Para isso, uma triagem foi realizada por redução de MTT (brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-brometo difenil tetrazolina) para avaliar a atividade citotóxica de oito compostos na linhagem celular BHK-21, resultando no cálculo da concentração citotóxica 50% (CC50) e as concentrações não citotóxicas a serem utilizada em testes subsequentes para os compostos A1, A2, A3, A4, A5, A6, A7 e A8 (lapachol, β-lapachona, 2-Hidroxi-3-(β,β-dimetilvinil)-1,4-naftoquinona, 2-Cloro-1,4-naftoquinona e 4 derivados de lapachol). Em seguida, células BHK-21 foram incubadas com os compostos em concentrações não citotóxicas em diferentes diluições e infectadas com os sorotipos 1 e 2 DENV na multiplicidade de infecção (MOI) de 5 e 2 para os sorotipos 1 e 2, respectivamente. A atividade antiviral foi testada através da análise de redução de MTT e pela titulação de virus liberados no sobrenadante. Apesar de alguns compostos terem apresentado redução de até uma unidade logarítmica no número de partículas virais, os resultados indicaram que estes fármacos não demonstraram atividade antiviral nas condições experimentais testadas.
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    Análise fitoquímica e bioprospecção para atividade antimicrobiana de Protium spruceanum (Benth.) Engler.
    (2016) Amparo, Tatiane Roquete; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Brandão, Geraldo Célio; Vieira Filho, Sidney Augusto
    Devido ao crescimento de patógenos resistentes aos fármacos atuais, a pesquisa por novos antimicrobianos tem sido incentivada, principalmente através das plantas medicinais. A espécie vegetal Protium spruceanum (Benth.) Engler, conhecida como breu, é utilizada popularmente como antiinflamatório e expectorante, porém, há necessidade de expandir estudos sobre essa espécie. Dessa forma, os objetivos desse estudo foram a avaliação da atividade antimicrobiana e o estudo fiquímico dos extratos etanólicos brutos (EEBs) e frações de folhas e galhos de P. spruceanum. Através dos métodos de difusão em poço e microdiluição, observou-se a atividade antimicrobiana dos EEBs contra 20 micro-organismos. O EEB de folhas apresentou maior atividade antimicrobiana total (AAT) que o EEB de galhos. As frações mais ativas foram as acetatoetilênicas e hidrometanólicas que apresentam ação sinérgica entre si. Através do estudo fitoquímico, observou-se que a AAT dos EEBs e frações pode ser corelacionada majoritariamente ao teor de taninos totais, porém, propõe-se uma ação sinérgica com outros compostos, como flavonóides. Os constituintes voláteis majoritários foram identificados utilizando CG/EM, dentre eles ácidos graxos, fenólicos e terpenoides, como amirinas. A avaliação da mistura de α- e β-amirina mostrou que esta não apresenta forte atividade antimicrobiana e também não está relacionada ao sinergismo entre as frações. Através de CLUE/DAD/EM-EM também foi possível identificar flavonoides glicosilados (quercetina-3-O-ramnosídeo, quercetina-3-Oglicuronídeo e campeferol-3-O-ramnosídeo) e taninos (catequina e procianidina). Os resultados in silico gerados pela ferramenta PASSonline indicaram potencial efeito antibacteriano principalmente para os constituintes majoritários das frações AcOEt e HMeOH. Também foram indicados como principais mecanismos de ação: aumento da permebilidade da membrana celular, inibição da bissíntese da parede bacteriana (enzimas peptideoglicano glicosiltransferase e CDP-glicerol glicerofosfotransferase) e inibição do metabolismo (enzimas 2-deidropantoato 2-redutase e piruvato cinase). Esses mecanismos de ação são diferentes dos antibióticos recentes e são considerados alvos para novos fármacos.
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    Anti-inflammatory activity of Protium spruceanum (Benth.) Engler is associated to immunomodulation and enzymes inhibition.
    (2019) Amparo, Tatiane Roquete; Seibert, Janaína Brandão; Mathias, Fernando Augusto Siqueira; Vieira, João Filipe Pereira; Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar; Freitas, Katia Michelle; Cabral, Vivette Appolinário Rodrigues; Brandão, Geraldo Célio; Santos, Orlando David Henrique dos; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Vieira, Paula Melo de Abreu
    Ethnopharmacological relevance: Protium spruceanum (Burseraceae) is used in Brazilian traditional medicine as anti-inflammatory, but the factors involved in this activity were not yet characterized. Aims of the study: analyze the aspects involved in the anti-inflammatory activity of polar fractions obtained from extracts of leaves and branches. Materials and methods: Hydromethanolic fraction was obtained by liquid-liquid partition from crude ethanolic extract and its compounds were identified by LC-DAD-MS. Activity tests were performed using LPS + IFN-γ stimulated J774A.1 macrophages. Cytokines were evaluated by CBA kit, NO by Griess method, ROS by DCFH-DA, N-acetylglucosaminidase (NAG) activity by spectrophotometric method, matrix-metalloproteinase (MMP-9) activity by zymography, inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression by immunofluorescence and cyclooxygenase (COX-2) expression by Western blot. Results: Fractions induced an increase of IL-6 and IL-10 which leads to the control of pro-inflammatory cytokines levels. The treatment with the fractions also reduced NO production at all concentrations tested in all evaluated periods. ROS production by the macrophages was inhibited by the treatment and the leaves fraction showed the best results with a lower concentration than that observed for the branches. The enzymes assays showed that leaves fraction inhibited NAG and MMP-9 activities, as well as, iNOS and COX-2 expression. These activities can be associated with the presence of procyanidin, catechin, rutin, quercitrin, isoquercitrin and kaempferol-3-O-rhamnoside, major compounds that were identified in the fraction. Conclusions: Anti-inflammatory activity of P. spruceanum is associated to an immunomodulatory effect that leads to inhibition of ROS, NO, NAG, MMP-9, COX-2 and iNOS.
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    Anti-Inflammatory and antioxidant properties of black mulberry (Morus nigra L.) in a model of LPS-induced sepsis.
    (2018) Lúcio, Karine de Pádua; Rabelo, Ana Carolina Silveira; Araújo, Carolina Morais; Brandão, Geraldo Célio; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Silva, Regislainy Gomes da; Souza, Débora Maria Soares de; Silva, André Talvani Pedrosa da; Bezerra, Frank Silva; Calsavara, Allan Jefferson Cruz; Costa, Daniela Caldeira
    Sepsis is a complex disease and is the cause of many deaths worldwide. Sepsis pathogenesis involves a dysregulated inflammatory response with consequent production of inflammatory mediators and reactive species. The production and excessive release of these substances into the systemic circulation trigger various cellular and metabolic alterations that are observed during the disease evolution. Thus, more studies have been carried out to investigate the therapeutic potential of plants such as Morus nigra L., popularly known as black mulberry. Studies have shown that plants belonging to the Morus genus are rich in secondary metabolites such as flavonoids which are associated with important biological activities as antioxidant and anti-inflammatory actions. Based on this context, the objective of our study was to evaluate the anti-inflammatory and antioxidant properties of Morus nigra L. in a sepsis model induced by LPS. Male C57BL/6 mice were distributed in four groups: control, sepsis, sepsis treated with leaf extract of mulberry, and sepsis treated with mulberry pulp. The animals were treated with 100 μL of their respective treatments for twenty-one days. Sepsis was induced at the 21st day with lipopolysaccharide (LPS) by intraperitoneal injection. The animals were euthanized 24 hours after receiving the LPS injection. The data obtained were analyzed in GraphPad Prism 6.0 software. Our results showed that treatment with either extract significantly decreased the number of leukocytes in the bronchoalveolar lavage fluid and serum levels of TNF in septic animals. Regarding the redox status, the treatments significantly decreased the antioxidant activity of the enzyme glutathione peroxidase. Regarding metalloproteinase type 2, it was observed that the treatment with black mulberry pulp was able to significantly reduce the activity of this enzyme concerning the sepsis group. Finally, these results together promoted an increase in the animal’s survival that received the black mulberry leaf or pulp extract.
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    Anti-zika activity of Ouratea semiserrata and dereplication of its constituents.
    (2021) Ferreira, Gabriel Monteze; Silva, Breno de Mello; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Oliveira, Alaíde Braga de; Brandão, Geraldo Célio
    Zika virus is an arbovirus that has vector mosquitoes of the genus Aedes. In adult humans, the infection may be asymptomatic or present mild symptoms such as itching and low fever. However, the infection is associated with other severe problems, which encouraged investigations for an effective treatment against this virus. This work evaluated the potential anti-Zika virus effect of the ethanolic extract of Ouratea semiserrata (Mart. & Nees) Engl., Ochnaceae, a medicinal plant popularly used in Brazil for the treatment of viral infections. The extract of the stems was prepared by cold percolation using ethanol as solvent and its content dereplicated by ultra-high-performance liquid chromatography-diode array detector-tandem mass spectrometry. Phenolic com- pounds including rutin, catechin, and epicatechin were identified as the major constituents. The antiviral activity was tested in vitro against Zika virus by the MTT colorimetric method. The ethanol extract inhibited the viral replication cycle with an EC50 of 37.5 μg/ml, and at the concentration of 100 μg/ml, a 100% inhibition of the viral cytopathic effect was obtained. Rutin and epicatechin inhibited viral cytopathic effect in Vero cells with EC50 > 50.00 μg/ml.
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    Antibacterial activity of extract and fractions from branches of Protium spruceanum and cytotoxicity on fibroblasts.
    (2017) Amparo, Tatiane Roquete; Rodrigues, Ivanildes Vasconcelos; Seibert, Janaína Brandão; Souza, Rafaella Hilda Zaniti; Oliveira, Amanda Ribeiro de; Cabral, Vivette Appolinário Rodrigues; Vieira, Paula Melo de Abreu; Brandão, Geraldo Célio; Okuma, Adriana Akemi; Vieira Filho, Sidney Augusto; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Souza, Gustavo Henrique Bianco de
    The crude ethanol extract (CEE) and fractions from branches of Protium spruceanum were subjected to antibacterial and cytotoxicity assays. Compounds of the most active fraction were identified by GC-MS and LC-MS. CEE was active against 19 bacteria and the ethyl acetate fraction (EAF) showed the lowest minimum bactericidal concentration (MBC 0.3–80.0 mg/mL). Through time-kill assay was observed that EAF induced rapid bactericidal effect against Staphylococcus saprophyticus. The cytotoxicity tests against L929 fibroblasts showed great potential of EAF on the treatment of infections caused by five bacteria (MBC < IC50). The results provide in vitro scientific support to the possible application of branches of P. spruceanum as antimicrobial agent that may contribute for treatment of infections.
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    Antibacterial substances from leaves of Protium spruceanum (Burseraceae) : in vitro and in silico evaluation.
    (2020) Amparo, Tatiane Roquete; Rodrigues, Ivanildes Vasconcelos; Seibert, Janaína Brandão; Almeida, Tamires Cunha; Cabral, Vivette Appolinário Rodrigues; Vieira, Paula Melo de Abreu; Brandão, Geraldo Célio; Oliveira, Mauro Lúcio Gonçalves de; Silva, Glenda Nicioli da; Santos, Orlando David Henrique dos; Vieira Filho, Sidney Augusto; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Souza, Gustavo Henrique Bianco de
    Due to the increase of bacterial resistance, the search for new antibiotics is necessary and the medicinal plants represent its most important source. The aim of this study was to evaluate the antibacterial property of extract and fractions from Protium spruceanum leaves, against pathogenic bacteria. By means of diffusion and microdilution assays, the crude extract was active against the nine bacteria tested being the hydromethanolic fraction the most active. During phytochemical procedures, procyanidin (1) and catechin (2) were identified as the main antibacterial constituents of this fraction. In silico results obtained using PASSonline tool indicated 1 and 2 as having good potential to interact with different targets of currently used antibiotics. These results no indicated potential to none DNA effect and indicated the cell wall as mainly target. Electrophoresis result supported that had no DNA damage. Cell wall damage was confirmed by propidium iodide test that showed increased membrane permeability and by cell surface deformations observed in scanning electronic microscopy. The in vitro assays together with the in silico prediction results establish the potential of P. spruceanum as source of antibacterial compounds that acts on important bacterial targets. These results contribute to the development of natural substances against pathogenic bacteria and to discovery of new antibiotics.
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    Antiedematogenic and antinociceptive effects of leaves extracts from Protium spruceanum Benth.
    (2013) Rodrigues, Ivanildes Vasconcelos; Souza, Juliana Neves de Paula; Silva, Ana Cláudia G.; Chibli, Lucas Apolinário; Cabral, Vivette Appolinário Rodrigues; Vieira Filho, Sidney Augusto; Perazzo, Fábio Ferreira; Guimarães, Andrea Grabe; Souza, Gustavo Henrique Bianco de
    Ethnopharmacological relevance: In traditional medicine, gums and oil-resins from Protium species have been used for many diseases, however, there are no reports of studies of Protium spruceanum’ leaves. Materials and methods: The antiedematogenic and antinociceptive effects of crude ethanol extract (EEB) from leaves of P. spruceanum and its fractions were evaluated in biological models. The fractions were obtained with hexane (FHEX) and methanol (FMEOH). Rat paw edema induced by carrageenan, writhing test, formalin test, hot plate test and the toxicity of EEB were performed. Results: Phytochemical analysis has shown the presence of a and b-amyrins as major constituents of FHEX. Promising results of anti-inflammatory and antinociceptive activity were found for EEB, FHEX and FMEOH. Also were observed the EEB at 6000 mg/kg showed no toxicity. Conclusions: One might suggest that the activities of FHEX are due to the presence of a and b-amyrins and contributes to the biological activities of EEB.
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    Antinociceptive and edematogenic activity and chemical constituents of Talinum paniculatum Willd.
    (2010) Ramos, Maria Perpétua Oliveira; Silva, Grácia Divina de Fátima; Duarte, Lucienir Pains; Peres, Valdir; Miranda, Roqueline Rodrigues Silva de; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Belinelo, Valdenir José; Vieira Filho, Sidney Augusto
    Talinum paniculatum (Portulacaceae) is popularly known in the region of Patos de Minas, Minas Gerais State, Brazil, as “Maria Gorda” or “Benção-de-Deus” and in traditional medicine it is used to treat inflammatory processes in general. After dried and fragmented, the plant was sequentially submitted to exhaustive percolation with hexane, ethyl acetate and methanol. The crude extracts were investigated for their anti-edematogenic and anti-nociceptive activities through formalin-induced paw edema model. In comparison with a non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) indomethacin, the hexane and ethyl acetate extracts showed higher anti-edematogenic and anti-nociceptive activity. In addition, through phytochemical studies, from these extracts were isolated and identified potassium nitrate (1), the mixture of long chain hiodrocarbons hentriacontane (2), dotriacontane (3), tritriacontane (4) and pentatriacontane (5). heneicosanoic acid (6), the ester nonacosyl nonacosanoate (7), urea (8), 3-O-b -Dglucosyl- b -sitosterol (9); the mixture of b -sitosterol (10) and stigmasterol (11), and a pentaciclyc triterpene 3-O-acethyl-aleuritolic acid (12). X-Ray difratometry was used for the characterization of inorganic constituent. TLC, HR-CG and spectrometric methods (IR. 1H and 13C NMR) were used to identify the structures of organic compounds. To the best of our knowledge, it is the first time that compound 1 to 8 and 12 are cited as constituents of T. paniculatum.
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    Antitumor effect of Cymbopogon densiflorus (Linneu) essential oil in bladder cancer cells.
    (2020) Pereira, Gizele Lucia da Costa; Almeida, Tamires Cunha; Seibert, Janaína Brandão; Amparo, Tatiane Roquete; Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar; Rodrigues, Ivanildes Vasconcelos; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Santos, Orlando David Henrique dos; Silva, Glenda Nicioli da
    The aim of this study was to analyse the antitumor effect of the Cymbopogon densiflorus essential oil in silico and in vitro on bladder cancer cells RT4 and T24, with different TP53 status. The oil was extracted by hydrodistillation and the gas chromatography coupled to the mass spectrometry was used for characterisation. In silico analysis was carried out by Pass online software. Cytotoxicity, cell proliferation, cell cycle progression, apoptosis and wound healing assays were performed. Five major compounds were identified. In silico analysis showed that major compounds present high potential for antitumor activities. The treatment with C. densiflorus essential oil reduced cell viability of bladder cancer cells. Only in wild-type cells, the increase of apoptosis rates and the decrease of cell migration were observed. In conclusion, the C. densiflorus essential oil presents antitumor effects on TP53 wild-type and mutated bladder cancer cells, however, the mechanism of action is TP53 status-dependent.
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    Aqueous extract of Baccharis trimera improves redox status and decreases the severity of alcoholic hepatotoxicity.
    (2017) Rabelo, Ana Carolina Silveira; Araújo, Glaucy Rodrigues de; Lúcio, Karine de Pádua; Araújo, Carolina Morais; Miranda, Pedro Henrique de Amorim; Silva, Breno de Mello; Carneiro, Ana Cláudia Alvarenga; Ribeiro, Erica Milena de Castro; Lima, Wanderson Geraldo de; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Brandão, Geraldo Célio; Costa, Daniela Caldeira
    The metabolism of ethanol occurs mainly in the liver, promoting increase of reactive oxygen species and nitrogen, leading to redox imbalance. Therefore, antioxidants can be seen as an alternative to reestablish the oxidizing/reducing equilibrium. The aim of this study was to evaluate the antioxidant and hepatoprotective effect of aqueous extract of Baccharis trimera (Less.) DC., Asteraceae, in a model of hepatotoxicity induced by ethanol. The extract was characterized and in vitro tests were conducted in HepG2 cells. It was evaluated the cells viability exposed to aqueous extract for 24 h, ability to scavenging the radical DPPH, besides the production of reactive oxygen species and nitric oxide, and the influence on the transcriptional activity of transcription factor Nrf2 (12 and 24 h) after exposure to 200 mM ethanol. The results showed that aqueous extract was non-cytotoxic in any concentration tested; moreover, it was observed a decrease in ROS and NO production, also promoting the transcriptional activity of Nrf2. In vivo, we pretreatment male rats Fisher with 600 mg/kg of aqueous extract and 1 h later 5 ml/kg of absolute ethanol was administrated. After two days of treatment, the animals were euthanized and lipid profile, hepatic and renal functions, antioxidant status and oxidative damage were evaluated. The treatment with extract improved liver function and lipid profile, reflecting the reduction of lipid microvesicules in the liver. It also promoted an increase of glutathione peroxidase activity, decrease of oxidative damage and MMP2 activity. These results, analyzed together, suggest the hepatoprotective effect of B. trimera aqueous extract.
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    Atividade moluscicida e interações moleculares da nitazoxanida com Limnoperna fortunei.
    (2018) Freitas, Lorran Miranda Andrade de; Andrade, Milton Hércules Guerra de; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Cardoso, Leonardo Máximo; Isoldi, Mauro César; Vieira Filho, Sidney Augusto; Andrade, Milton Hércules Guerra de
    O Limnoperna fortunei é responsável por impactos econômicos, principalmente no setor hidrelétrico responsável pela maior parte da produção de energia elétrica no Brasil. Atualmente o cloro é o agente mais empregado no combate às infestações pelo L. fortunei, entretanto, sua utilização é limitada pelas agências ambientais devido ao potencial tóxico. A substância 2-acetolyloxy-N-(5-nitro-2-thiazolyl)-benzamide (NTZ) induziu mortalidade de 80 a 60% em concentrações de 5 a 1 ppm respectivamente. Nessas concentrações, a droga possui baixa toxicidade em organismos superiores aeróbicos. Estudos em peixes demonstraram baixo potencial toxicológico, indicando que pode ser usada com segurança na dose 1 ppm. Visando alcançar melhor desempenho da droga e utiliza-la em menores concentrações, a amônia foi associada a 1 ppm para ampliar o efeito moluscicida do NTZ. Nossos resultados mostram uma potencialização do efeito e uma mortalidade de 80% com um dose 10 vezes menor associada a 1 ppm de ammonia. A droga pode ser facilmente removida da água de descarte logo após o tratamento de tubulações, se recolhida em reservatório contendo 1% de suspensão de cravão ativado sob agitação. Essa suspensão remove pelo menos 99% de pulsos de concentrações de 5 ppm em 15 segundos de exposição. Além disso, a capacidade máxima de retenção do carvão atinge 10% do seu peso. Esse estudo traz como perspectiva imediata a criação de um sistema de fluxo contínuo de remoção do NTZ da água de rejeito e a possibilidade dispensa-la em águas fluviais sem causar danos ambientais. O NTZ foi imobilizado em Sepharose, com o objetivo de isolar e identificar as proteínas que interagem de forma específica ao NTZ. Empregando-se a espectrometria de massas foram identificadas algumas proteínas ligantes que foram analisadas como possíveis alvos de ação. A arginina quinase, considerada alvo de drogas antiparasitárias e enzima fundamental para a manutenção do organismo em anaerobiose, foi identificada na fração retida. Os resultados de ensaios enzimáticos demonstram que o NTZ inibe arginina quinase em concentrações molares de 10-4M. Devido a importância dessa enzima e a possiblidade de acúmulo da droga durante a filtração de água realizada por esses organismos consideramos a possibilidade que esse mecanismo possa explicar o efeito tóxico do NTZ sobre o L. fortunei. Além disso, a interação entre a droga e proteínas envolvidas na regulação da apoptose também poderiam contribuir para essa atividade tóxica.
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    Avaliação da atividade antioxidante e fenóis totais dos óleos extraídos das sementes de Moringa oleifera lam.
    (2020) Anunciação, Kamila de Fátima; Sousa, Lucas Resende Dutra; Amparo, Tatiane Roquete; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Vieira, Paula Melo de Abreu; Santos, Viviane Martins Rebello dos; Melo, Tânia Márcia Sacramento
    A Moringa oleifera Lamarck é uma planta nativa da Índia, que apresenta em suas sementes e folhas uma variedade de compostos orgânicos reconhecidos pela alta capacidade antioxidante. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antioxidante in vitro de extratos e óleos das sementes e sementes/folhas da M. oleífera Lam. Também foi determinado o teor de compostos fenólicos totais dos extratos pelo método de Folin-Ciocalteu e avaliação da citotoxicidade para fibroblastos humanos pelo método de sulforodamina B. Os resultados mostraram que o extrato etanólico da semente apresentou maior atividade antioxidante, o teor de fenólicos totais desse extrato foi de 235,11 ± 73,49 mg EAG/g e não apresentou elevada citotoxicidade nas concentrações testadas. O extrato etanólico de sementes de M. oleífera Lam possui bom potencial antioxidante e baixa citotoxicidade.
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    Avaliação das propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes de Morus nigra L. (blackberry) em um modelo murino de sepse induzido por LPS.
    (2018) Lúcio, Karine de Pádua; Costa, Daniela Caldeira; Calsavara, Allan Jefferson Cruz; Costa, Daniela Caldeira; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Cardoso, Leonardo Máximo
    A sepse é uma doença complexa, de alta incidência nas unidades de terapia intensiva (UTIs) sendo a causa de muitos óbitos no mundo inteiro. A patogênese da sepse envolve uma resposta inflamatória desregulada com consequente produção de mediadores inflamatórios e espécies reativas. A produção e liberação excessiva dessas substâncias na circulação sistêmica desencadeiam as diversas alterações celulares e metabólicas que são observadas durante a evolução da doença. Alguns trabalhos científicos tem investigado plantas como Morus nigra L., conhecida popularmente como amoreira-preta, pois sabe-se que as plantas desse gênero apresentam um grande potencial terapêutico. Estudos já mostraram que as plantas pertencentes a este gênero são ricas em metabólitos secundários como os flavonoides que apresentam atividades biológicas importantes. Com base nesse contexto, o objetivo do nosso estudo foi avaliar as propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes de Morus nigra L. em modelo murino de sepse induzido por LPS. Para isso, camundongos machos da linhagem C57Bl/6, com oito semanas de idade e peso médio entre 20-25g foram distribuídos em quatro grupos experimentais, a saber: controle (C), sepse (S), sepse tratado com extrato das folhas da amoreira (SF) e sepse tratado com a polpa de amora (SP). Os animais foram tratados com 100μl de seus respectivos tratamentos, por gavagem, durante vinte e um dias. A sepse foi induzida no 21º através de injeção intraperitoneal com lipopolissacarídeo (LPS). Os animais foram eutanasiados 24 horas após receberem a injeção de LPS e amostras de plasma, fígado e lavado bronco-alveolar foram coletados e armazenados para análises posteriores. Os dados obtidos a partir das dosagens laboratoriais foram analisados no software GraphPad Prism 5.0 para Windows (San Diego, California, USA). Nossos resultados mostraram que os tratamentos com a polpa e o extrato das folhas diminuíram significativamente o infiltrado de leucócitos nos pulmões e os níveis séricos de TNF nos animais sépticos. Com relação aos marcadores de processos redox, ambos os tratamentos diminuíram significativamente a atividade antioxidante da enzima glutationa peroxidase (GPx). No que diz respeito à metaloproteinase do tipo 2 (MMP-2) observamos que o tratamento com a polpa da amora foi capaz de reduzir significativamente a atividade dessa enzima em relação ao grupo sepse. Por fim, esses resultados positivos em conjunto, promoveram o aumento na sobrevida dos animais sépticos que receberam o extrato das folhas ou a polpa de amora.
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    Avaliação do potencial terapêutico da quercetina sobre o desequilíbrio redox e inflamação em células e camundongos expostos à fumaça de cigarro.
    (2021) Araújo, Natália Pereira da Silva; Bezerra, Frank Silva; Menezes, Rodrigo Cunha Alvim de; Bezerra, Frank Silva; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Araújo, Raquel Silva; Cardoso, Valbert Nascimento; Zin, Walter Araújo
    A fumaça de cigarro é altamente tóxica e a sua inalação promove o aumento da produção de espécies reativas, bem como uma resposta inflamatória pulmonar e sistêmica em seja em modelos experimentais ou em humanos. A quercetina é um potente antioxidante dietético que exibe atividades antiinflamatórias. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da quercetina na redução do desequilíbrio redox e da inflamação induzidos pela exposição, in vitro e in vivo, em curto e longo prazo, à fumaça do cigarro. In vitro, a quercetina nas concentrações de 25 e 50 μM, atenuou os efeitos do extrato da fumaça do cigarro diminuindo a geração de espécies reativas de oxigênio e óxido nítrico em macrófagos alveolares J774A.1. In vivo, camundongos machos C57BL/6 foram divididos em cinco grupos: controle (CG), veículo (VG), quercetina (QG), fumaça de cigarro (CSG), quercetina e fumaça de cigarro (QCSG). CSG e QCSG foram expostos à fumaça de cigarro por cinco e sessenta dias consecutivos. Ao término do protocolo experimental, os animais foram eutanasiados e foram retirados o lavado broncoalveolar, o sangue, o tecido pulmonar e hepático. Os camundongos que receberam 10 mg/kg/dia de quercetina diluída em uma solução de propilenoglicol/Salina (50%) via gavagem orogástrica, uma hora antes da primeira exposição à fumaça de cigarro por cinco dias, apresentaram uma diminuição no influxo de leucócitos no lavado broncoalveolar, reestabelecendo o desequilíbrio redox, com isso, preservando o padrão histológico do parênquima pulmonar e a função pulmonar em comparação com o grupo exposto à fumaça de cigarro. No segundo estudo, os camundongos que receberam a mesma dose de QC antes da exposição à fumaça de cigarro por 60 dias apresentaram um menor influxo de células inflamatórias, estresse oxidativo, reação inflamatória e alterações histopatológicas no fígado em comparação aos animais expostos a fumaça de cigarro. Esses resultados sugerem que a quercetina atuou de forma preventiva em células e tecidos de diferentes modelos experimentais de exposição a fumaça de cigarro.
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    Avaliação in vitro da atividade antitumoral e antiviral frente ao Zika vírus de naftoquinonas sintéticas.
    (2017) Moura, Hélia Maria Marques de; Brandão, Geraldo Célio; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Brandão, Geraldo Célio; Magalhães, José Carlos de; Santos, Orlando David Henrique dos
    As quinonas constituem uma classe de substâncias bastante conhecidas e com grande diversidade estrutural. Essa diversidade estrutural, bem como as várias atividades biológicas já descritas para elas, motiva o interesse de novas pesquisas com esta classe de substâncias. O presente trabalho teve como objetivo a avaliação da atividade antitumoral e antiviral frente ao Zika virus de naftoquinonas sintéticas em modelos in vitro. A atividade antitumoral foi avaliada frente a três linhagens celulares de origem tumoral, TOV-21, HepG-2 e T 24. Já a atividade antiviral foi avaliada in vitro contra o ZIKV empregando o método colorimétrico do MTT (n = 3); a citotoxicidade foi determinada in vitro em linhagem celular Vero, susceptível ao ZIKV. Adicionalmente, as substâncias que apresentaram maior citotoxicidade foram testadas contra fibroblastos de humanos (MRC-5), linhagem de célula não tumoral, com o objetivo de avaliar a seletividade. Foram avaliadas vinte e três naftoquinonas frente a cinco linhagens de células, onde as concentrações citotóxicas cinquenta por cento CC50 variaram de 0,0001 a 515,7 μg/mL. Nos ensaios antivirais, as substâncias selecionadas não foram capazes de inibrir a replicação do ZIKV, uma vez que nas concentrações não citotóxicas para as células o efeito antiviral não foi significativo em relação ao controle de vírus. Os resultados deste estudo mostraram que as substâncias testadas, em sua maior parte, foram citotóxicas nas concentrações testadas. Além disso, podemos destacar o alto índice de seletividade (300.0) da substância NQ 2 diante da linhagem tumoral Hep-G2, quando comparamos às células da linhagem de fibroblastos de humanos MRC-5.
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    Avaliação in vitro do potencial leishmanicida de derivados de aldiminas e adutos de Hantzsch.
    (2016) Salomão, Neyza Emilia de Oliveira; Reis, Alexandre Barbosa; Reis, Alexandre Barbosa; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Marques, Marcos José
    A Leishmaniose Visceral (LV) é a forma mais grave e devastadora da doença, que se não diagnosticada e tratada a tempo leva a óbito. O tratamento convencional da LV é baseado num repertório terapêutico restrito de fármacos como o antimoniato pentavalente e a anfotericina B, que apresentam elevada toxicidade. Dessa forma, o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas e a prospecção de novos fármacos é fundamental para o controle e tratamento da doença. Uma possível alternativa para novos medicamentos são os compostos sintéticos, e neste cenário encontram-se os derivados de aldiminas e adutos de Hantzsch que demonstraram prévia ação antifúngica e leishmanicida. Assim, nesse estudo propusemos testar in vitro a ação leishmanicida destes derivados de aldiminas (n=7) e adutos de Hantzsch (n=5) em diferentes células e por metodologias distintas. Avaliamos a citotoxicidade dos diferentes compostos pelo método colorimétrico de Brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2il)-2,5-difenil tetrazólio (MTT) em macrófagos murino (J774.A1) e canino (DH82) sendo observada uma maior citotoxicidade nos compostos de Aldiminas 3I5 e 3D7 com IC50 de 15 e 10 μg/ml, respectivamente. Ao contrário e de maneira satisfatória, os A. de Hantzsch demonstraram uma baixa citotoxicidade em comparação às formulações de aldiminas. A ação leishmanicida em promastigotas de L. infantum, cepa (OP46), dos diferentes compostos ocorreu logo após as 24 de tratamento com valores de redução inferiores a 25% da viabilidade, sendo mais evidenciada, principalmente no tempo de 72 horas de contato com as aldiminas (3H8 e 3G2) e com os a. Hantzsch (8B5 e 8B6) a viabilidade das promastigotas foi reduzida acima de 50%. Para a avaliação in vitro da atividade leishmanicida em amastigotas do parasito foram empregados macrófagos caninos DH82 infectados com promastigotas de L. infantum (OP46) e tratados com os diferentes compostos químicos por 24, 48 e 72 horas, sendo avaliado por análise microscópica bem como por citometria de fluxo empregando a L. infantum cepa (OP46) transfectada com o gene repórter GFP e os resultados encontrados foram semelhantes entre as duas metodologias empregadas (microscopia e citometria de fluxo). De um modo geral foi observado redução no percentual de infecção principalmente após 48 horas de tratamento para os compostos testados. No grupo das aldiminas, os compostos 3H8, 3H9 e 3D7 apresentaram reduções maiores na taxa de infecção dos macrófagos, chegando a porcentagens de redução próximas ao controle positivo tratado com Anfotericina B. Nos compostos do grupo de a. de Hantzsch destacam-se os compostos 8A2, 8B5 e 8B6, em que principalmente o 8B6 mostrou redução significativa no percentual de infecção em relação ao grupo controle em ambos os testes (microscopia e citometria de fluxo) em todos os tempos de avaliação (24, 48 e 72 horas). Os resultados in vitro demonstram à baixa citotoxicidade e satisfatória atividade leishmanicida tanto em promastigotas quanto em amastigotas de L. infantum de alguns dos compostos químicos de aldiminas (3H7 e 3D7) e a. de Hantzsch (8A4 e 8B6) testados. O conjunto de dados obtidos sugere que os compostos aqui avaliados possuem o potencial leishmanicida e merecem ser considerados bons candidatos para prosseguirem em estudos de quimioterapia experimental in vivo para Leishmaniose Visceral.
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    Baccharis trimera improves the antioxidant defense system and inhibits iNOS and NADPH oxidase expression in a rat model of inflammation.
    (2013) Pádua, Bruno da Cruz; Rossoni Júnior, Joamyr Victor; Magalhães, Cíntia Lopes de Brito; Seibert, Janaína Brandão; Araújo, Carolina Morais; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Chaves, Míriam Martins; Silva, Marcelo Eustáquio; Pedrosa, Maria Lúcia; Costa, Daniela Caldeira
    Acetaminophen is a common analgesic and antipyretic compound which, when administered in high doses, has been associated with significant morbidity and mortality, secondary to hepatic toxicity. Although this may be due to a direct interaction of reactive acetaminophen metabolites with hepatocyte proteins, recent studies have suggested that reactive species produced by neutrophils also contribute to the pathophysiological process. Researches on the chemical composition of B. trimera show that this plant has bioactive compounds such as flavonoids, related to the organism’s protection against free radicals. Therefore, in the present study, using Fischer rats, the effect of B. trimera on the antioxidant defense system, the production of nitric oxide (NO) and on the expression of nitric oxide synthase (iNOS), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and of the subunits of the NADPH oxidase in neutrophils was evaluated in a model of phagocytosis induced by zimosan (ZC3b) and in a model of inflammation induced by acetaminophen. The results show that the treatment with B. trimera improves the defense system of antioxidant and restores the balance ROS / NO that is altered in the inflammatory process induced by APAP. In conclusion, B. trimera extracts exert antioxidant properties by scavenging ROS and decrease the expression of genes responsible by reactive species production in neutrophils.
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    Baccharis trimera inhibits reactive oxygen species production through PKC and down-regulation p47phox phosphorylation of NADPH oxidase in SK Hep-1 cells.
    (2017) Araújo, Glaucy Rodrigues de; Rabelo, Ana Carolina Silveira; Meira, Janaína Serenato; Rossoni Júnior, Joamyr Victor; Borges, William de Castro; Cota, Renata Guerra de Sá; Batista, Maurício Azevedo; Lemos, Denise da Silveira; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Brandão, Geraldo Célio; Chaves, Míriam Martins; Costa, Daniela Caldeira
    Baccharis trimera, popularly known as ‘‘carqueja’’, is a native South-American plant possessing a high concentration of polyphenolic compounds and therefore high antioxidant potential. Despite the antioxidant potential described for B. trimera, there are no reports concerning the signaling pathways involved in this process. So, the aim of the present study was to assess the influence of B. trimera on the modulation of PKC signaling pathway and to characterize the effect of the nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase enzyme (NOX) on the generation of reactive oxygen species in SK Hep-1 cells. SK-Hep 1 cells were treated with B. trimera, quercetin, or rutin and then stimulated or notwith PMA/ionomycin and labeled with carboxy H2DCFDA for detection of reactive oxygen species by flow cytometer. The PKC expression by Western blot and enzyme activity was performed to evaluate the influence of B. trimera and quercetin on PKC signaling pathway. p47phox and p47phox phosphorylated expression was performed byWestern blot to evaluate the influence of B. trimera on p47phox phosphorylation. The results showed that cells stimulated with PMA/ionomycin (activators of PKC) showed significantly increased reactive oxygen species production, and this production returned to baseline levels after treatment with DPI (NOX inhibitor). Both B. trimera and quercetin modulated reactive oxygen species production through the inhibition of PKC protein expression and enzymatic activity, also with inhibition of p47phox phosphorylation. Taken together, these results suggest that B. trimera has a potentialmechanism for inhibiting reactive oxygen species production through the PKC signaling pathway and inhibition subunit p47phox phosphorylation of nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase.